［文献解读］食管癌的异质性与进化

Tracking the genomic evolution of esophageal adenocarcinoma through neoadjuvant chemotherapy
Cancer Discov. Aug  2015

摘要
1.文章展示了食管腺癌（EAC）的进化频谱，表现为复杂的驱动突变、平行进化以及基因组加倍
2.阐明异质程度与新辅助治疗（NAC）疗效的相关性：异质性低的宿主，NAC疗效更好
3.多部位测序（M-seq）显示：CTT区域的T>G突变随着肿瘤进化显著减少；含铂的NAC会增加CpC区域的C>A突变
. T4 b  Z* t% `% y) f+ |' n  L4.基因组不稳定性是EAC进化的早期事件，会导致化疗过程中产生可靶向的原癌基因扩增，为未来的治疗方案提供理论基础
背景
1.食管癌预后不良，过去20年EAC在西方国家的患病率显著上升
' W1 M, I7 X. ^, p! U5 m% j2.手术前NAC治疗能够改善患者预后，但是50-60%的肿瘤对治疗耐药
3.对单个肿瘤多部位的M-seq数据进行进化分析，可以区分存在于所有部位的早期突变
9 n7 X5 @0 P9 E! y6 C( }& v0 |
Multi-tumor regions
( R, D1 d4 @* z. P; h! ?; F方法
4 l+ i; N" T% [: z" R; m
6 a* B$ c7 j: R7 ~0 i结果——体细胞突变的瘤内异质性

以EAC005患者为例
对NAC前后的突变频谱进行进化分析（parsimony ratchet method），可将突变分为四类：
% @$ o  k9 c; ?; K# Y# l1.主干（蓝色，ubiquitous）突变：存在于肿瘤组织的所有部位
+ Y/ ]- p' [" d+ @; u# x  x2.共享（橙色）突变：存在于1个以上的部位中
3.NAC前的独有（红色）突变：仅存在NAC前的1个部位
4.NAC后的独有（绿色）突变：仅存在NAC后的1个部位
后三类均属heterogenous突变
0 J; u% r9 s4 d+ J
1 `8 ~* f+ r4 ]+ D5 O* ^' D9 Y! M其余7例患者的进化分析
+ w2 e( c* y+ s7 W/ R; x; R
# o2 Y2 F% c. {% P" A3 z& U. [异质程度与新辅助治疗（NAC）的疗效相关：化疗前异质性越低的宿主，NAC疗效越好。

为了定量分析肿瘤细胞中的SNVs，作者整合了三个变量（拷贝数，VAF和肿瘤负荷）来计算Cancer Cell Fraction (CCF)，并且将SNV进行聚类。

! a5 @' h. T) _结果显示：
1.单一部位取材不能准确分析克隆频谱，因为一些热点突变仅存在于某个部位且显示出高CCF，如EAC001患者中的SLC39A12 pA44E突变
2.通过不同部位的共享突变位点个数，可以判断部位间的空间距离，如EAC001患者的R2离R1比R4更近

/ o* _0 f: q+ }% P5 aM-seq结果还显示EAC样本中还存在大量的拷贝数变异
1.超过40%的变异来自于扩增（A），说明基因组扩增是肿瘤进化的早期事件
$ `3 z5 }6 u. P% C7 M2.通过与TCGA中ESCA的数据进行比对，发现有15个片段在至少一个肿瘤中存在扩增。这些片段大多对应可作为靶点的原癌基因。
2 ]1 ?; l) E: E结果——突变频谱的时空解析

/ s4 l* O$ H) ^2 c& qTrunk代表早期突变；Branch代表晚期突变
) P% t0 a; Y! V% ?0 C: d% M2 ?结果显示： T>G突变随着肿瘤进化显著减少

) o. Y: ^) z* y* K$ i1 b3 N接受含铂药物的NAC治疗会产生特异的分子标签， C>A突变增多
, ^* a7 t! ~0 @9 ?5 z
本文从时间（新辅助前后）和空间（多部位测序）两个维度对食管癌的分子进化图谱进行了阐述和解析。
讨论
1.EAC的单样本检测会低估肿瘤异质性和突变负荷。虽然M-seq检测到的总突变中位数远高于单个部位检出的突变，但仍然只检到肿瘤的局部
2.基因组扩增和TP53、CDKN2A等抑癌基因的突变是EAC的驱动事件
  }8 f9 ]+ s  y  ^3.原癌基因的扩增普遍存在且不受含铂药物的干扰，但有可能成为新药物靶点
4.NAC的纵向实验可能进一步解析瘤内异质性与细胞毒反应及复发的关系，用来预判治疗耐药以降低治疗的医源性影响
转自吉因加科技微信订阅号
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